O preparo preliminar ao tratamento, talvez seja mais importante que ele próprio.
Testes de reserva ovariana podem ser recomendados, para prever como os ovários vão responder à medicação de indução. As chances de sucesso podem ser pobres se, por exemplo, os testes demonstrarem diminuição da reserva ovariana ou do potencial de fertilidade.
A reserva ovariana pode ser determinada medindo os níveis de FSH e estradiol no segundo ou terceiro dia do ciclo menstrual, por um teste de citrato de clomifeno, ou contagem do número inicial de folículos no ovário (contagem antral do folículo). Um nível de FSH e/ou um estradiol elevados, é associado a taxas de gravidez reduzidas, especialmente em mulheres com idade acima de 35 anos. Anomalias da cavidade uterina tais como fibrose, pólipos, ou septo podem precisar ser corrigidos antes do tratamento de fertilização. Uma hidrossalpinge, uma Tuba uterina obstruída, reduz as chances de sucesso na FIV.

O sêmen também é analisado antes do tratamento de fertilização. Se for encontrado algum tipo de anomalia, deve-se orientar a consulta com um especialista na infertilidade masculina, que determinará se há problemas corrigíveis ou interesses subjacentes da saúde.
Quando o sêmen não puder ser coletado através de masturbação, outros métodos podem ser utilizados, como eletroejaculação (EEJ), aspiração microepididimal de esperma (MESA), aspiração epidídima percutânea do esperma (PESA), ou a extração testicular do esperma (TESE). EEJ pode ser um modo eficaz coletar o esperma de homens com problemas de lesão na medula espinhal, onde impulsos elétricos são utilizados para estimular a próstata. O MESA pode ser executado para a recuperação de esperma após vasectomia e em alguns homens com ausência de vasos diferentes. TESE envolve a biópsia e a recuperação testicular do esperma diretamente do tecido testicular e pode ser executado em um consultório com anestesia local. O esperma obtido por estes métodos pode ser congelado, armazenado, e descongelado mais tarde para uma futura fertilização.

O estilo de vida deve ser modificado antes do tratamento de reprodução assistida. Mulheres fumantes, por exemplo, podem baixar as chances de sucesso em até 50%. O álcool e as drogas podem ser prejudiciais, e o consumo excessivo da cafeína deve ser evitado.
Ácido fólico deve ser receitado antes do tratamento, e reduz o risco de defeitos de tubo neural tais como espinha bífida. Mulheres devem tomar as vitaminas pré-natais que contenham pelo menos 400 mg de ácido fólico diário antes de começar um ciclo de FIV.